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发布时间: 2020-04-13 19:04
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垂直电泳槽漏液的原因

电泳槽密封条漏液的原因与处理(垂直槽)

一般情况下,电泳槽较窄的密封条不易漏夜,反之较宽的则比较容易漏,发现电泳槽漏液时要检查:

1、密封条是否老化或损坏,若已经老化或损坏,应更换密封条。

2、如果密封条完好无损,目测检查密封条是否有凹凸不平现象,小型蛋白电泳槽,如果有应将密封条拆下进行重新安装。安装时注意不要拉扯密封条,电泳槽,使其自然地嵌入密封槽内,并保证安装均匀,避免密封条出现凹凸现象。

3、如果缓冲液是从密封条的中间漏出,则说明漏处比两边凹(不在同一水平线上),我们则需要把密封条拆下,清理干净槽内胶粘剂,然后再将薄厚相当的窄边条(如0.4毫米)粘在槽内,以垫起凹下的密封条,使其与两边保持一致,此后再将密封条粘在槽内即可。

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蛋白凝胶电泳的分类

蛋白凝胶电泳分为非变性凝胶和变性凝胶

所谓非变性凝胶,即在凝胶中不加SDS和尿素等变性剂,这种凝胶中,蛋白质仍保持活性,其迁移率受它的静电荷与分子大小两个因素的影响。因此在非变性凝胶中进行电泳是不能测得分子量的,常用于酶的鉴定、同工酶分析和提纯。

所谓变性凝胶,电泳槽报价,即在凝胶中加入变性剂,如尿素、SDS(十二烷基磺酸钠)、DTT等。这些变性剂可以破坏或改变蛋白质的结构,把绝大部分蛋白质分离成组成它们的亚基。同时在蛋白质分子周围包围了大量负电荷。这种电荷基本上掩盖了无变性剂存在时正常就有的任何电荷。蛋白质在这种变性凝胶中的迁移率与它们分子量的对数成直线关系。因此利用变性凝胶进行电泳可以测得蛋白质的分子量。目前应用较多的变性剂为SDS。

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转印电泳的分类及注意事项:

         Western Blotting(蛋白质单项电泳后印迹转移)

         Eastern Blotting(蛋白质双向电泳后印迹转移)

         Southern Blotting(DNA印迹)          Northern Blotting(RNA印迹)

在转印过程中要控制温度 ,在低温或者冷循环条件下进行

对于分子量大于100KD的蛋白质大分子不用半干转


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