DNA电泳常见问题分析及解决方案
DNA条带模糊:1,DNA降解避免核酸酶污染;2,电泳缓冲液陈旧电泳缓冲液多次使用后,Western blot厂家,离子强度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果。
建议经常更换电泳缓冲液;3,Western blot多少钱,所用电泳条件不合适电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃;巨大DNA链电泳,温度应<15℃;核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力;4,Western blot, DNA上样量过多减少凝胶中DNA上样量;5,DNA样含盐过高电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐;6,有蛋白污染电泳前酚抽提去除蛋白;7,DNA变性电泳前勿加热,用20mM NaCl缓冲液稀释DNA
不规则DNA条带迁移:1, 对于λ/Hind III片段cos位点复性电泳前于65℃加热DNA 5分钟,然后在冰上冷却5分钟;2,电泳条件不合适电泳电压不超过20V/cm;温度<30℃;经常更换电泳缓冲液;3,DNA变性以20mM NaCl Buffer稀释DNA,电泳前勿加热
带弱或无DNA条带:1,DNA的上样量不够增加DNA的上样量;聚酰胺凝胶电泳比琼脂糖电泳灵敏度稍高,上样量可适当降低;2, DNA降解避免DNA的核酸酶污染;3,DNA走出凝胶缩短电泳时间,降低电压,增强凝胶浓度;4,对于EB染色的DNA,所用光源不合适应用短波长(254nm)的紫外光源
DNA带缺失:1,小DNA带走出凝胶缩短电泳时间,降低电压,增强凝胶浓度;2,分子大小相近的DNA带不易分辨增加电泳时间,核准正确的凝胶浓度;3, DNA 变性电泳前请勿高温加热DNA链,以20mM NaCl Buffer稀释DNA;4,DNA链巨大,常规凝胶电泳不合适 在脉冲凝胶电泳上分析
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LF-31F型 大型水平电泳槽
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产品特点:
正负电极的铂金丝直径均为0.26mm,纯度为99.95%,
结实耐用,电场稳定。
上盖开孔设计,便于散热、观察。
样品梳的齿数高达52齿,Western blot生产厂家,且方便排枪加样。
基本参数:
电泳槽正负电极的铂金丝直径均为0.3mm,
纯度为99.95%。
凝胶面积(W×L):250×240mm。
样品梳:52齿,1.5mm,适用于排枪加样。
LF-31DS型 水平琼脂糖电泳槽
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技术参数:
电极铂金丝直径为0.26mm,纯度为99.95%,电场强大、稳定;
凝胶板规格(L×W):60×60mm;120×60mm(宽胶);
60×120mm(长胶);120×120mm;
样品梳:11 25齿(1.0mm厚);6 13齿,8 18齿(1.5mm厚);
2 3齿(2.0mm厚) ;
缓冲液总容量:约650ml
产品用途:适用于分离、制备DNA、RNA。
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