琼脂糖水平电泳槽实验操作
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1. 根据电泳需要，Western blot价格，配置合适浓度的电泳及制胶缓冲液。一般为 1× TAE或0.5×TBE。
注意：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。
2. 根据制胶量及凝胶浓度，在加有一定量的电泳缓冲液的三角锥瓶中，加入准确称量的琼脂糖粉。
注意：总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量。
3. 在微波炉中加热溶解琼脂糖
注意：必须保证琼脂糖充分完全溶解，否则，会造成电泳图像模糊不清。加热时如胶液剧烈沸腾发泡，停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。
4.使溶液冷却至60℃左右，如需要可在此时加入EB溶液使其终浓度为0.5ug/ml，并充分混匀（EB为危险品，不提倡使用）。注意：EB是一种致癌物质。使用含有EB的溶液时，请戴用手套。EB在可见光下会分解。
5.将琼脂糖溶液倒入制胶托盘中，然后在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在5－8 mm 之间。
注意：不要产生气泡，溶液温度太高(>60℃)，会使得水分
过分蒸发，改变凝胶离子浓度，影响电泳效果。
6.在室温下使胶凝固（大约30 分钟），Western blot多少钱，然后放置于电泳槽中进行电泳。
注意：凝胶不立即使用时，用保鲜膜将凝胶包好在4℃下保存，或者放在制胶的缓冲液中，一般可保存2～5 天。
转印电泳
转印电泳的分类及注意事项：
Western Blotting（蛋白质单项电泳后印迹转移）
Eastern Blotting（蛋白质双向电泳后印迹转移）
Southern Blotting（DNA印迹） Northern Blotting（RNA印迹）
在转印过程中要控制温度 ，在低温或者冷循环条件下进行
对于分子量大于100KD的蛋白质大分子不用半干转
北京龙方科技专业生产、销售电泳槽，福建Western blot，以下信息由龙方科技为您提供。
转印电泳的一抗和二抗
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一抗孵育：将LG用稀释液稀释到适当的浓，在摇床上孵育2h（如果做过预实验后发现条带较淡，可以适当降低一抗稀释度或者延长一抗孵育时间）
洗膜：用PBST或者TBST洗膜5 X 5min，Western blot生产厂家，如果预实验中发现背景过高，可以增加洗膜时间或洗膜次数
二抗孵育：二抗是辣根过氧化物酶(HRP)标记的LG， 摇床上孵育2h（如果做过预实验后发现条带较淡，可适当降低延长二抗孵育时间）
洗膜：用PBST或者TBST洗膜3 X 10min
T：Tween-20（去污剂）
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