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电泳的分类


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电泳可分为显微电泳,自由界面电泳和区带电泳三种,其中区带电泳操作简便,容易推广,因此常用于分离鉴定。区带电泳又称区域电泳,即电泳在不同的惰性支持物中进行,使各组分成带状区间。区带电泳的形式,仅按某一特点分类似乎都不全方面。这里基于支持物的物理性状、装置形式、pH值的连续性等不同,可分为:


(一)按支持物物理性状

1. 滤纸及其它纤维素薄膜电泳 如纸电泳、醋酸纤维素薄膜电泳。

2. 凝胶电泳 如琼脂糖、淀粉胶、聚丙烯酰胺凝胶电泳,电泳仪电源,制成凝胶板或凝胶柱。

3. 粉末电泳 如纤维素、淀粉、琼脂粉等,将粉末与适当的溶剂调和,铺成平板。

4. 线丝电泳 如尼龙丝、人造丝电泳,是一类微量电泳。

(二)按支持物的装置形式

1. 平板式电泳 电泳支持物(如凝胶)制成水平板状。

2. 垂直板式电泳 板状支持物,在电泳时,按垂直方向进行。

3.连续—流动电泳 首先应用于纸电泳,将滤纸垂直竖立,两边各放一电极,缓冲液和样品自顶端下流,与电泳方向垂直。也可以用其它材料作支持物。该法主要用途是制备一定量的电泳纯物质。

4.圆盘电泳 电泳支持物灌制在两通的玻璃管中,被分离的物质在其中泳动后,区带呈圆盘状。

(三)按pH的连续性




琼脂凝胶电泳? 

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在凝胶电泳中,琼脂凝胶电泳是很早得到广泛应用的。因为它具有下列优点:①在琼脂凝胶中含有琼脂1%-1.5%,其余都是水,在这种凝胶中电泳,近似自由界面电泳,可是样品扩散又比自由界面电泳小;②琼脂凝胶电泳支持物均匀,电泳区带整齐,分辨率高,电泳仪电源价格,重复性好;③液相与固相界面无明显界限,电泳速度快;④琼脂凝胶透明而不吸收紫外线,可以直接用紫外检测仪测定;⑤区带容易染色,样品容易洗脱,利于制备;⑥干膜可以长期保存。? 除以上的优点外,琼脂凝胶电泳也有它的不足之处,因为琼脂是一种强酸性物质,能造成严重的电渗现象,影响电泳的速度,而且琼脂所含可溶性杂质难于除去。



电泳技术的基本原理

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带电荷的质点,在一-定条件的电场作用下,可向一极移动,如带正电荷的质点移向负极。许多生物分子都带有电荷,其电荷的多少取决于分子性质及其所在介质的pH和组成,由于混合物中各组分所带电荷性质、电荷数量以及分子量的不同,在同一电场的作用下,各组分泳动的方向和速度也各异。因此,在一定时间内,由于各组分移动距离的不同,电泳仪电源多少钱,而达到分离鉴定各组分的目的。

在电场中,推动带电质点运动的力(F)等于质点所带净电荷量(Q)与电场强度(E)的乘积: F=QE质点的前移同样要受到阻力(F)的影响,对于一个球形质点,服从Stoke定律,即:F"=6πrηv式中r为质点半径,η为介质粘度,v为质点移动速度。当质点在电场中作稳定运动时:F=F’ 即QE=6π rη V可见,球形质点的迁移率,首先取决于自身状态,即与所带电量成正比,与其半径及介质粘度成反比。除了自身状态的因素外,电泳体系中其它因素也影响质点的电泳迁移率。






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